بررسي گونه هاي خاص باكتريايي مرتبط با توليد تري متيل آمين -N- اكسيد(TMAO) و سطح پلاسمايي كولين بيماران كبد چرب غيرالكلي در مقايسه با افراد سالم در استان كردستان

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

بيوشيمي

مقدمه و اهداف: بيماري كبد چرب غيرالكلي (NAFLD) عبارت است از تجمع پاتولوژيك چربي در هپاتوسيت هاي كبد به دلايلي غير از مصرف زياد الكل است. كولين يك جز ضروري براي سنتز VLDL توسط كبد است و كمبود آن باعث اختلال در سنتزVLDL تجمع كلسترول و اسيد هاي چرب در كبد و ايجاد NAFLD مي شود. برخي باكتري هاي روده باعث كاهش زيست دسترسي كولين مواد غذايي به دليل تجزيه و تبديل آن به TMA (Trimetyl Amine ) مي شوند. تركيب اخير توسط انزيم كبدي FMO3 (Flavin Monoxygenise ) به TMAO تبديل ميشود كه خود به عنوان يك ريسك فاكتور در التهاب كبد و پيشرفت بيمار كبد چرب غير الكلي نقش دارد. هدف از اين مطالعه بررسي حضور و فراواني هشت گونه باكتري مصرف كننده ي كولين شامل آنئارو كوكوس هيدروژناليز (Anaerococcus hydrogenalis)، كلسترديوم آسپارژيوفرم (Clostridium asparagiforme)، كلسترديوم هاتوويي (Clostridium hathewayi)، پروتئوس پنري(Proteus penneri ) و پروويدنسياردجري (Providencia rettgeri)، اشرشيا فرگوسوني(Escherichia fergusonii)، ادوارد سيلاتاردا (Edwardsiella tarda)، كلسترديوم اسپوروژنز(Clostridium sporogenes) و نيز ارتباط ان با سطح پلاسمايي كولين در بيماران كبدچرب غيرالكلي استان كردستان است. مواد و روش ها: 85 بيمار كبدچرب غيرالكلي تاييده شده و 30 نفر بعنوان گروه كنترل بررسي شد. تست‌هاي آزمايشگاهي ( TG، LDL،HDL،Chol، AST،ALT) براي هر دو گروه انجام شد. سنجش كولين سرمي در هردو گروه با استفاده از روش HPLC با دتكتور فلورسانس انجام شد. تشخيص باكتري هاي مورد نظر با روش مولكولي PCR و به كمك پرايمر هاي اختصاصي طراحي شده بر عليه ژن cutC انجام شد. ميزان بيان كلي ژن cutC نيز با استفاده از روش qPCR انجام شد. نرم افزار SPSS و ازمون هاي آماري Chi-square test ، من ويتني يو (Mann-Whitney U) و كولموگروف_اسميرنوف( Kolmogorov-smirnov) جهت آناليز آماري داده ها استفاده شد. يافته ها: به غير از LDL، سطح پلاسمايي پارامترهاي ارزيابي شده در دو گروه به طور معني داري متفاوت بود. (0.001P(ALT)<، 0.001P(AST)<، 0.001 P(Cholestrol)< ، P(LDL)= 0.136، 0.002HDL<)P. ميانگين سطح پلاسمايي كولين بطور معناداري در افراد بيمار كمتر از افراد سالم بود (0.001P=). فراواني پنچ گونه از هفت گونه ي باكتريايي در بيماران شناسايي شد و به صورت زير بود: (آنئاروكوكوس هيدروژناليز=68.1%)، (كلسترديوم آسپارژيوفرم=45.1%)، (پروويدنسياردجري=19.6%)، (كلسترديوم هاتويي=50%)، (پروتئوس پنري=33.3%). به صورت جداگانه در هر كدام از گروه هاي بيمار و سالم اختلاف ميانگين سطح پلاسمايي كولين در دو گروه داراي باكتري و بدون باكتري و به تفكيك هر كدام از باكتري ها مورد بررسي قرار گرفت و ارتباط معني داري در هيچكدام يافت نشد (0.05<P). همچنين به صورت جداگانه در هر كدام از گروه هاي بيمار و سالم اختلاف ميانگين ميزان كمي ژن cutC در دو گروه داراي باكتري و بدون باكتري و به تفكيك هر كدام از باكتري ها مورد بررسي قرار گرفت و ارتباط معني داري در هيچكدام يافت نشد (0.05<P). همبستگي معناداري بين ميزان كمي ژن cutC با ميزان سرمي كولين در بين افراد بيمار و سالم يافت نشد. همبستگي بين ميزان كمي ژن cutC با مقادير عددي تست هاي ازمايشگاهي AST، ALT، TG، Cholesterol، HDL، LDL و سن مورد بررسي قرار گرفت كه براي هيچكدام از تست هاي آزمايشگاهي همبستگي معني داري با cutC يافت نشد. همچنين همبستگي بين ميزان سرمي كولين با مقادير عددي تست هاي ازمايشگاهي AST، ALT، TG، Cholesterol، HDL، LDL و سن مورد بررسي قرار گرفت كه براي هيچكدام از تست هاي آزمايشگاهي در دو گروه بيمار و سالم به صورت جداگانه همبستگي معني داري با ميزان كولين سرمي يافت نشد اما به صورت گروه كلي (بيمار+سالم) همبستگي معني داري بين ميزان كولين سرمي با ميزان ALT، TG، Cholesterol، HDL، Age وجود داشت. ضريب همبستگي كولين با HDL به صورت مثبت بود يعني هرچقدر ميزان كولين افزايشي بود ميزان HDL هم روند افزايشي را نشان داد اما براي ALT،TG، cholesterol ضريب همبستگي به صورت منفي و بالعكس بود. نتيجه گيري: سطح پلاسمايي كولين در افراد بيمار كمتر از افراد سالم بود، هرچند كه ارتباط معناداري بين غلظت پلاسمايي كولين با فراواني پنچ گونه ي باكتري هاي مصرف كننده كولين و فراواني ژن cutC وجود نداشت كلمات كليدي: كبد چرب غير الكلي، كولين، فلور روده، انزيم كولين تري متيل آمين لياز

206563

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

بيوشيمي

پزشكي

دانشگاه علوم پزشکي کردستان

زكريا وهاب زاده