بررسي تاثير آديپوكاين واسپين بر مسير سيگنالينگ استئاتوز و فيبروز در سلول‌هاي كبدي

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

پزشكي مولكولي

مقدمه: بيماري كبد چرب غيرالكلي (NAFLD) يك بيماري مزمن كبدي است كه به سرعت در حال تبديل شدن به يك مشكل بهداشت عمومي است. عدم تعادل در توزيع چربي به كبد و متابوليسم آن باعث استئاتوز كبدي مي‌شود. واسپين يك آديپوكاين تازه كشف شده است كه با بيماري‌هاي مختلف متابوليكي در ارتباط است. اثرات واسپين بر پاتوژنز استاتوز و فيبروز و مكانيسم‌هاي مرتبط مشخص نيست. بنابراين، اين مطالعه مكانيسم مولكولي واسپين را در استئاتوز كبدي و فيبروز در محيط‌هاي كشت دو بعدي و سه بعدي مورد بررسي قرار مي‌دهد. روش‌ها و مواد: سلول‌‌هاي HepG2 با اسيدهاي چرب (FFA) باغلظت 2/1 ميلي‌مولار تحت تيمار قرار گرفتند و مقادير چربي داخل سلول با رنگ نيل اندازه‌گيري شد. روش RT-qPCR براي ارزيابي اثر واسپين و مهار گيرنده GRP78 بر بيان ژن‌هاي دخيل در ليپوژنز، بتا اكسيداسيون، جذب، ترشح اسيد چرب (FA) و ژن‌هاي التهابي در كشت دو بعدي و سه بعدي (كلاژن ژل) استفاده شد، همچنين فعاليت آنزيمي AMPK مورد بررسي قرار گرفت. در كشت هم‌زمان سلول‌هاي HepG2 و LX2، بيان پروتئين‌هاي اصلي درگير در فيبروز كبدي با استفاده از وسترن بلاتينگ مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. يافته ها: نتايج مطالعه حاضر نشان داد كه واسپين در رده سلولي HepG2، باعث افزايش اكسيداسيون و ترشح FA و فعاليت آنزيمي AMPK شده و همچنين باعث كاهش بيان ژن‌هاي درگير در ليپوژنز و جذب FA مي‌شود. تجزيه و تحليل داده‌هاي وسترن بلات در كشت همزمان HepG2 و LX2 نشان داد كه بيان پروتئين α-SMA و TGF-β1 كاهش مي‌يابد. نتيجه گيري: نتايج نشان داد كه واسپين به عنوان يك تنظيم كننده جديد استئاتوز كبدي از طريق گيرنده GRP78 عمل مي‌كند و به طور موثر باعث كاهش فيبروز كبدي از طريق فعال سازي AMPK، كاهش بيان ژن NF-κB و همچنين بيان پروتئين TGF-β1 و α-SMA مي‌شود. تفاوت بيان اين ژن‌ها در كشت دو بعدي در مقايسه با كشت سه بعدي معني‌دار نبود. كلمات كليدي: بيماري كبد چرب غيرالكلي، ليپوژنز، سلول هاي ستاره‌اي كبدي، تكنيك كشت سه بعدي، اينفلاموزوم

210131

دانشگاه علوم پزشكي كردستان

پزشكي مولكولي

پزشكي

دانشگاه علوم پزشکي کردستان

محمد رامان مولودي، زكريا وهاب زاده