اثر ملاتونين بر نرخ تكوين، شاخص هاي اپي ژنتيكي و طول تلومر در جنين هاي حاصل از انتقال هسته سلول هاي سوماتيك در گوسفند

اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان

مهندسي كشاورزي

دكتري

ميزان كارايي تكوين در جنين¬¬¬هاي حاصل از شبيه¬سازي به دليل نقص¬هاي مختلف از جمله استرس اكسيداتيو و نقص در باز برنامه ريزي اپي¬ژنتيك (در شرايط برون تني و درون تني)، ضعيف مي¬باشد. بهبود اين نقايص در جنين¬هاي حاصل از شبيه¬سازي ممكن است با اضافه كردن آنتي¬اكسيدان¬ها به محيط كشت برون¬تني نويدبخش باشد. ملاتونين به عنوان يك مولكول با عملكرد چند گانه مي¬تواند تكوين جنين حاصل از شبيه¬سازي را بهبود بخشد. با اين وجود، عملكرد آن در جنين حاصل از شبيه¬سازي گوسفند نامشخص است. لذا در مطالعه حاضر، به بررسي اثر ملاتوين بر ميزان كارايي تكوين جنين، بازبرنامه ريزي طول تلومر و بررسي تغييرات اپي¬ژنتيك در جنين¬هاي حاصل از شييه¬سازي گوسفند پرداخته شد. براي اين منظور، نمونه¬هاي تخمدان گوسفندي از كشتارگاه جمع آوري شد. سپس طي فرايند شبيه سازي، نمونه¬هاي تخمك بازسازي شده در محيط كشت جنين تيمار شده با غلظت¬هاي 1/0 نانومولار، 10 نانومولار و 1 ميكرومولار ملاتونين و گروه كنترل ( بدون ملاتونين) كشت داده شدند. نتايج به¬دست آمده در اين مطالعه نشان داد افزودن 10 نانومولار ملاتونين به محيط كشت جنين به مدت 7 روز سبب رشد برون¬تني رويان جنين گوسفندي با نرخ بالاي بلاستوسيست گرديد. علاوه بر اين، كيفيت جنين¬هاي بلاستوسيست¬ حاصل از شبيه¬سازي در گروه¬هاي تيمار شده با 10 نانومولار ملاتونين از نظر توده سلول داخلي(ICM)، ترفكتودرم(TE)، تعدادكل سلول¬ها(TCN) و بيان ژن NANOG در مقايسه با گروه كنترل افزايش قابل توجهي يافت(05/0>p). يافته¬ها نشان دهنده آن بود كه درگروه تيمار شده با 10 نانومولار ملاتونين سطح راديكال آزاد( ROS)، سطح سلول¬هاي آپوپتوز، بيان ژن CASPASE-3 و نسبت بيان ژن¬هاي BAX/BCL2 به ميزان قابل توجهي كاهش مي¬يابد(05/0>p). علاوه بر اين، 10 نانومولار ملاتونين باعث افزايش پتانسيل غشاي ميتوكندري و وضعيت اتوفاژي (افزايش تعداد نقاط LC3B) شد(05/0>p). همچنين افزودن 10 نانومولار ملاتونين سبب كاهش سطح متيلاسيون(5mC) و افزايش سطح هيستون استيلاسيون(H3K9ac) در گروه جنين¬هاي بلاستوسيست¬ حاصل از شبيه¬سازي تيمار شده با ملاتونين در مقايسه با بلاستوسيست¬هاي گروه كنترل گرديد(05/0>p). يكي از نتايج بسيار ارزشمند حاصل شده در مطالعه حاضركه براي اولين بار مورد بررسي قرار گرفت آن بود كه به¬كارگيري 10 نانومولار ملاتونين سبب افزايش طول تلومر در جنين¬هاي حاصل از شبيه¬سازي گوسفند گرديدكه مي¬تواند تكوين جنين حاصل از شبيه¬سازي پس از لانه¬گزيني را بهبود بخشد. بطور كلي، يافته¬هاي مطالعه حاضر بيانگر آن است كه ملاتونين مي¬تواند علاوه بر افزايش ظرفيت آنتي¬اكسيداني، كاهش آسيب DNA و افزايش كيفيت جنين¬هاي بلاستوسيست حاصل از شبيه¬سازي، باز برنامه ريزي طول تلومر در جنين¬هاي حاصل از شبيه¬سازي گوسفند را تسريع كند.

212472

علوم دامي (ژنتيك و اصلاح نژاد دام)

مهندسي كشاورزي

دانشگاه صنعتي اصفهان

امير حسين مهدوي، فرنوش جعفرپور

احمد رياسي، مجيد طالبي، ابوالقاسم اسماعيلي

سعيد انصاري مهياري، محمد حسين نصر اصفهاني