غربالگري و بررسي فعاليت آنزيمي آميلاز از باكتري‌هاي مولد

اصفهان : دانشگاه صنعتي اصفهان

بيوتكنولوژي كشاورزي

كارشناسي ارشد

نشاسته بعنوان منبع انرژي يكي از اجزاي اصلي جيره غذايي طيور است كه توسط اكثر گياهان سبز توليد شده و بيش از 70-80 درصد دانه‌هاي غلات را تشكيل مي‌دهد. طيور در دستگاه گوارش خود آنزيم¬هايي توليد مي¬كنند كه نشاسته را به قندهاي ساده تر به منظور سهولت جذب در روده تجزيه مي¬كنند. آلفا آميلاز يكي از آنزيم¬هايي است كه مسئول تجزيه مولكول¬هاي پيچيده نشاسته به قندهاي ساده¬تر مانند مالتوز و گلوكز است. اين تجزيه در نهايت باعث بهبود فرآيند جذب در روده طيور مي‌شود، بدين معني كه براي دستيابي به رشد و عملكرد بهينه خوراك استفاده از آنزيم¬ها ضروري مي¬باشد. آنزيم آلفا آميلاز يك آنزيم آميلوليتيك با كاربردي گسترده درصنايع مختلف مي‌باشد كه موجودات زنده، مخصوصا ميكروارگانيسم‌ها پتانسيل توليد اين آنزيم را دارند. از جمله اين ميكروارگانيسم‌ها، باكتري‌ها مي‌باشند كه قادرند در زمان كمتر، توليد مثل و رشد بيشتري داشته باشند. لذا شناسايي سويه¬هاي مولد با پتانسيل بالاي توليد آلفا آميلاز و همچنين دستيابي به آنزيمي با ويژگي¬ها مطلوب دمايي و pH به منظور كاهش هزينه¬هاي توليد آنزيم در اولويت است. در اين مطالعه 60 سويه‌ي توليد كننده آنزيم آلفا آميلاز از آب و خاك مناطق مختلف جدا شده و از نظر توليد آلفا آميلاز، مورد غربالگري قرار گرفتند. بعد از ارزيابي¬هاي كمي و كيفي صورت گرفته نشان داده شد كه 4 سويه (S1، S3، S4 و S5 ) توانايي بيشتري در توليد آلفا آميلاز از خود نشان دادند. براساس منحني استاندارد مالتوز و بيش¬ترين ميانگين جذب اندازه-گيري شده، ميانگين غلظت آنزيم براي سويه¬هايS1، S3، S4 و S5 به ترتيب 30918، 33717، 25183 و 23662 u/gr محاسبه شد. سويه S3 با توجه به فعاليت در گستره بيشتر دمايي و pH و توليد آنزيم با كارايي بيشتر، نسبت به ديگر سويه‌ها عملكرد بهتري داشت. آلفا آميلاز توليد شده، توسط سولفات آمونيوم خالص¬سازي و جرم مولكولي آنزيم براساس آناليز ژل SDS-PAGE، 56000 دالتون تخمين زده شد. بررسي بيشتر سويه¬ها براساس توالي ژن 16S rRNAو rpoB نشان داد 3 سويه (S3, S4, S5) ، ارتباط نزديكي با جنس و گونه باسيلوس سابتيليس دارند.

231284

بيوتكنولوژي كشاورزي

مهندسي كشاورزي

دانشگاه صنعتي اصفهان