بررسي مقايسه اي اثر دانترولن و 2-آمينو اتيل دي فنيل بورينات بر پيرايش mRNA ژنXbp-1 در موش هاي C57 تيمار شده با اندوتوكسين سودوموناس آئروژينوزا

رشت

ميكروب شناسي

هدف: سودوموناس ائروژينوزا يك بيماريزاي گرم منفي فرصت طلب است كه جنس هاي آن موجب بيماري هاي عفوني گوش مياني و عفونت هاي سمي زخمهاي سوختگي، اندوكارديت، مننژيت، سپتي سمي و شوك اندوتوكسيك مي شود. اندوتوكسين (LPS) باكتري‌هاي گرم منفي از اصلي ترين واسطه هاي التهابي است كه نقش مهمي در سيستم بيولوژي شوك سپتيك باكتريايي از طريق ويرايش رونوشت ژنِ XBP-1 سيستم (UPR) Unfolded Protein Response در پي¬دارد. UPR كه در پاسخ به استرس در غشاء اندوپلاسميك سلول رخ مي‌دهد نقش موثري در هوموستازي كلي بدن از راه تنظيم جريان يون كلسيم به داخل سلول بر عهده دارد. اثبات شده است كه آشفتگي در جريان يون كلسيم مي تواند مرگ برنامه‌ريزي شده سلول (آپوپتوز) را از طريق سنسور IRE-1 از UPR كه توسط LPS تحريك شده است در پي داشته باشد. مواد و روش¬ها: سودوموناس ائروژينوزا از زخم بيماران سوختگي جدا و با استفاده از روشهاي بيوشيميايي مورد شناسايي قرار گرفت. ليپوپلي-ساكاريد سودوموناس ائروژينوزا با استفاده از كيت تخليص اختصاصي تجاري، تخليص شد. سپس به موشها در گروه هاي طراحي شده تزريق و كبد هر موش براي بررسي رونوشت ژنِ XBP-1 پس از استخراج RNA و سنتز cDNA با استفاده از RT-PCR مورد بررسي قرار گرفت. گروه هاي حيواني پس از 2،8 و 24 ساعت پس از تيمار با LPS+Dantrolen، LPS+2-amino-ethyl-diphenyl borinate ، LPS+2-amino-ethyl-diphenyl borinate+Dantrolen وLPS مورد بررسي قرار گرفتند. بحث و نتيجه¬گيري: مطالعات نشان مي دهد كه استفاده از مهاركنندگان كانال كلسيم (كانالهاي L) و تركيب آن با LPS ( دانترولن +LPS) موجب ويرايش رونوشت XBP-1 در 4 موش از 6 موش در ساعت هاي 2 و 8 پس از تيمار مي شود در حاليكه در ساعت 24 تنها 2 موش از 6 موش تحت اين ويرايش قرار گرفته اند. همچنين،استفاده از مهار كننده كانال كلسيم 2-آمينواتيل دي¬فنيل¬بورينات+LPS، شمار كمتري از ويرايش ها را به تنهايي به نسبت دانترولن به تنهايي، از خود نشان داد. 3 رونوشت ويرايش شده از ژن XBP-1 در ايستگاه هاي زماني 2 و 8 و تنها يك ويرايش در ايستگاه زماني 24 پس از تيمار ديده شد. در آخرين گروه مطالعاتي از تجويز همزمان هردو مهار كننده كانال كلسيمي و+LPS استفاده شد و نتايج برجسته تر بود و تقريبا تمام موشها در تمام ساعات تحت ويرايش رونوشت XBP-1 قرار گرفتند. در نهايت اين نتايج پيشنهاد مي كند كه تركيب توامان مهاركنندگان كانال كلسيم اثربخشي بهتري براي اثربخشي مقابله با شوك اندوتوكسيك باكتريايي دارد. واژه¬هاي كليدي: سودوموناس ائروژينوزا، اندوتوكسين (LPS)، پاسخ پروتئين پيچ¬نخورده (UPR)، IRE-1، XBP-1، سپسيس، شوك سپتيك، مهاركنندههاي كانال¬هاي كلسيمي

30603

پزشكي

علوم پزشكي گيلان

عابدين زاده، محمود Abedinzade, Mahmoud

هدايتي چكوسري، مجتبي