بررسي امكان كنترل بيولوژيك پژمردگي باكتريايي گوجه‌فرنگي توسط برخي جدايه‌هاي باكتريايي

دانشگاه ولي عصر(عج) رفسنجان

كارشناسي ارشد

پژمردگي باكتريايي ناشي از Ralstonia solanacearum يكي از مخرب‌ترين بيماري‌هاي خاكزي است كه عامل آن داراي تنوع ژنتيكي وسيع مي‌باشد. دامنه‌ي ‌ميزباني اين بيمارگر بسيار گسترده است و در مناطق گرمسيري و نيمه‌گرمسيري به گياهاني همچون سيب‌زميني و گوجه‌فرنگي خسارت قابل توجهي وارد مي‌سازد. براي يافتن آنتاگونيست‌هاي موفق، انتخاب روش غربالگري مناسب از اهميت فراواني برخوردار است. در اين پژوهش، 120 جدايه از خاك نواحي ريزوسفر گوجه‌فرنگي جدا سازي و اثرات بيوكنترلي و ميزان بازدارندگي آن‌ها در شرايط آزمايشگاهي مورد بررسي قرار گرفت. به منظور غربالگري اوليه، دو روش انجام شده و صحت انتخاب آنتاگونيست‌ها در هر روش، بر اساس مطالعات گلخانه‌اي مورد ارزيابي و مقايسه قرار گرفت. در روش اول، قدرت بيوكنترلي جدايه‌ها در شرايط درون شيشه‌اي ارزيابي شدند. بعد از گذشت هشت روز علائم نكروز و پژمردگي در گياهان شاهد مايه‌زني شده قابل رويت بود. روش دوم، قدرت بازدارندگي جدايه‌ها با روش هاله بازدارنده بر روي محيط نوترينت آگار (NA)ارزيابي و قطر هاله بازدارندگي اندازه‌گيري شد. نتايج نشان داد كه هشت جدايه قابليت بازدارندگي از رشد پاتوژن را دارند. مقايسه دو روش غربالگري نشان داد كه تنها برخي از جدايه‌ها در هر دو روش اثرات آنتاگونيستي مشابهي داشتند. نتايج نشان داد كه غربالگري به روش درون شيشه‌‌اي از همبستگي مناسبي با نتايج گلخانه‌اي برخوردار است. به طوري كه اكثر عوامل آنتاگونيست منتخب، در اين روش توانستند در گلخانه نيز عامل بيماري را به خوبي كنترل نمايند اما تمامي جدايه‌هاي منتخب در غربالگري به روش هاله بازدارنده توانايي مهار بيماري در شرايط گلخانه را نداشتند. اين عدم همبستگي بين نتايج روش‌ هاله بازدارنده و گلخانه‌اي بيانگر آن است كه احتمال حذف عامل بيوكنترل كارآمد در اين روش زياد است و سبب خطا در انتخاب عامل آنتاگونيست مي‌گردد. با بررسي كلي نتايج مي‌توان پي برد كه مشاهدات ثبت شده در شرايط گلخانه‌اي صحت نتايج آزمون درون شيشه اي را تاييد مي كند. اين غربالگري روش سريع و حساس براي بررسي تعامل باكتري‌هاي بيمارگر و آنتاگونيست در شرايطي مشابه گلخانه و راه حل مناسبي جهت جاي‌گزيني با برخي روش‌هاي معمول هاله بازدارندگي در شرايط آزمايشگاهي است. جدايه‌هاي منتخب براساس آزمون‌هاي بيوشيميايي شناسايي شد و به منظور تكميل شناسايي جدايه‌هاي آنتاگونيست بخشي از ناحيه 16S rDNA با به‌كارگيري آغازگر اختصاصي تكثير و تعيين ترادف گرديد. با مقايسه نتايج در پايگاه اينترنتي NCBI، جدايههاي منتخب Delftia acidovorans،stenotrophomonas maltophilia و Arthrobacter معرفي شدند. همچنين توانايي توليد بيوفيلم، توليد سيدروفور، سيانيد ‌هيدروژن و اكسين ارزيابي و مشخص شد كه اين سويه‌ها به همراه دو استرين T17-4 و VUPF5 پتانسيل كنترل بيماري پژمردگي باكتريايي گوجه‌فرنگي را دارند.

57256

دانشگاه وليعصر رفسنجان

احمد حسيني -محمدي نژاد

بيماري شناسي

روح اله صابري ريسه